禽流感病毒ELISA检测试剂盒说明书
【兽药名称】
通用名 禽流感病毒ELISA检测试剂盒
商品名 无
英文名 Avian Influenza Virus ELISA Kit
汉语拼音 Qinliugan Bingdu Meilianmianyixifushiyan Jianceshijihe
【主要成分与含量】
(1)单抗包被板 封口膜应封闭良好,孔底应清洁透明,无异物,96孔/块,1块/盒。
(2)一抗(兔抗AIV-NP,白色盖子) 应为无色透明液体,装量10ml/瓶,1瓶/盒。
(3)羊抗兔IgG酶标抗体(蓝色盖子) 应为无色透明液体,装量10ml/瓶,1瓶/盒。
(4)样品处理液(白色盖子) 应为无色透明液体,装量100ml/瓶,1瓶/盒。
(5)阳性对照(红色盖子) 应为淡红色透明液体,装量1ml/管,1管/盒。
(6)阴性对照(蓝色盖子) 应为无色透明液体,装量1ml/管,1管/盒。
(7)底物液A(红色盖子) 应为无色透明液体,装量10ml/瓶,1瓶/盒。
(8)底物液B(黑色盖子) 应为无色透明液体,装量10ml/瓶,1瓶/盒。
(9)终止液(蓝色盖子) 应为无色透明液体,装量10ml/瓶,1瓶/盒。
(10)20倍浓缩洗涤液(白色盖子) 应为无色透明液体,装量30ml/瓶,1瓶/盒。
(11)说明书 1份
【作用与用途】 用于检测禽流感病毒(包括所有禽流感病毒亚型,但是不能区分)。
【用法与判定】
1 用法
1.1 样品处理
1.1.1 鸡胚尿囊液样品处理 取一定量尿囊液按1:1加入等体积样品处理液后,置36~38℃作用15分钟,应间隔3~5分钟混匀1次,以10000转/分钟离心30~60秒,取上清待检。
1.1.2 内脏组织样品处理 称取内脏组织块约1g,置匀浆器中,加入样品处理液1ml,匀浆,冻融3次后,于36~38℃作用15分钟,以10000转/分钟离心5分钟,取上清待检。
1.1.3 喉头拭子和泄殖腔拭子样品处理 用无菌棉拭子于禽类喉头或泄殖腔中蘸取渗出液,然后浸泡于1ml样品处理液中,剧烈震荡1分钟后,弃棉拭子,液体冻融3次后于36~38℃作用15分钟,在2~8℃下以12000转/分钟离心5分钟,取上清待检。
1.2 取单抗包被板(根据样品多少可拆开分次使用),将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水稀释20倍后,每孔加入200?l稀释好的洗涤液,静置3分钟后倒掉并在吸水纸上拍干。
1.3 加入待检样品,每孔100?l,同时设阴、阳性对照孔,每孔100?l,各1孔,置36~38℃作用30分钟。
1.4 每孔加入200?l稀释好的洗涤液,静置3分钟后倒掉并在吸水纸上拍干,共计洗涤5次。
1.5 加入一抗(兔抗AIV-NP),100?l/孔,置36~38℃作用30分钟。
1.6 洗涤5次,方法同1.4.
1.7 加入羊抗兔IgG酶标抗体,100?l/孔,置36~38℃作用30分钟。
1.8 洗涤5次,方法同1.4.
1.9 每孔加底物液A、底物液B各一滴(约50?l),混匀,室温(20~25℃)避光显色10分钟。
1.10 每孔加入终止液一滴(约50?l),混匀后测定结果。
2 判定 在酶标仪上测各孔的OD630nm值。试验成立的条件是:阳性对照孔的OD630nm值≥0.8,且≤2.0;阴性对照孔的OD630nm值<0.2.样品OD630nm值>0.3时判为阳性;样品OD630nm值≤0.3时判为阴性。
【注意事项】
(1) 各液体试剂使用前应充分摇匀。
(2) 不同批号试剂盒的试剂组份不能混用。
(3) 未使用的抗原包被板切记不要撕开上面的封口膜。
(4) 使用者应遵守国家有关禽流感疫情报告、病毒分离、无害化处理等相关法律、法规。
(5) 使用完毕后,将所有样品、洗涤液和各种废弃物都进行灭活处理。
【规格】 96孔/盒。
【储藏与有效期】 2~8℃保存,有效期为6个月。
【批准文号】 兽药生字(2007)170048092
【生产企业】 武汉科前动物生物制品有限责任公司